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pcr缓冲液中各成分的作用是什么?(pcr缓冲液的成分与作用)

趣爱秀 2022-10-03 16:38:07 原文链接:网络

基本常识 PCR包括7种基本成分:模板DNA、特异性引物、热稳定DNA聚合酶、脱氧核苷三磷酸(dNTP)、二价阳离子、缓冲液及一价阳离子。

其中缓冲液:一般使用Tris-Cl缓冲液,标准为10mmol/L,并将其调节到8.3~8.8之间 配制方法(二种): 0.1mol/L Tris-Cl(1000mL) Tris碱 12.11g;ddH2O 800mL;HCl 49mL 三者混匀充分溶解后,滴加浓盐酸调pH至8.0,定溶至1000mL 0.01mol/L Tris-Cl(1000mL) Tris碱 1.211g;ddH2O 800mL;HCl 49mL 三者混匀充分溶解后,滴加浓盐酸调pH至8.0,定溶至1000mL 各成分用: Tris 本身一级胺,其 pKa 为 8 因此在 pH 7.5~8.5 有良好的缓冲能力 CL- 有一定的弱酸性

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